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怎樣減少ELISA試劑盒誤差
更新時間:2021-12-09   點擊次數(shù):1785次

ELISA試劑盒實驗操作中,誤差分有系統(tǒng)誤差、偶然誤差、過失誤差,而一個小小的誤差主意能夠影響到實驗,很多人往往因為一個小細(xì)節(jié),一個誤差沒能讓實驗成功。那么實驗誤差概率如何縮小?除了需要細(xì)心之外,還有一些需要重點注意的地方。今天上海通蔚生物科技教您如何才能減少ELISA誤差:


1:檢驗技師應(yīng)具備從事實驗室操作的基本素質(zhì)和實踐經(jīng)驗。能熟練操作實驗儀器、器械,具有一定總結(jié)和分析問題的能力,對實驗中出現(xiàn)的意外情況能及時妥善解決。


2:使用校對過的微量移液器,排除自然誤差。移液器準(zhǔn)確與否對定量檢測尤為重要。


3:仔細(xì)閱讀說明書,嚴(yán)格按照說明書要求進(jìn)行規(guī)范化操作。不同批號的試劑不可混用。值得改進(jìn)的地方,反復(fù)試驗確定成立后才能改進(jìn)。


ELISA實驗


4:洗滌*,如若洗板不*,酶結(jié)合物本底顯色會呈現(xiàn)假陽性。洗滌液要新鮮,現(xiàn)用現(xiàn)配,陳舊的洗滌液會出現(xiàn)本底增高現(xiàn)象,也可能出現(xiàn)假陽性。


5:嚴(yán)控反應(yīng)時間,反應(yīng)時間過長,酶失活;反應(yīng)時間過短,酶結(jié)合物不能與血清中的微生物抗原抗體充分結(jié)合,生成物結(jié)構(gòu)松散不牢固,容易洗掉,都可能造成假陰性。


6:注意試劑盒保存期,過保存期的試劑不能使用。


7:評估試劑的實用性,試劑的穩(wěn)定與否,對準(zhǔn)確率的高低到頭重要。在試劑啟用前,應(yīng)進(jìn)行陰、陽對照及樣品反復(fù)比照試驗,判定試劑符合要求后方可使用。


8:嚴(yán)格掌握顯色時間,顯色時間過短,加入終止液反應(yīng)終止后,底物結(jié)合物的量過少,易出現(xiàn)假陰性。超過顯色要求時間后顯色,應(yīng)判為假陽性,這可能與試劑本身有關(guān)。加顯色劑后立即顯色,不可報陽性,這可能是本底顯色的結(jié)果。


9:加樣要準(zhǔn)確、快速。如果加樣不準(zhǔn)確,酶生成物的量不能確定,直接影響顯色結(jié)果。顯色的深淺及A值的測定與加入顯色劑和終止液的量有關(guān),所以加樣應(yīng)慎重。要求在一定時間內(nèi)加樣完畢的實驗,如果加樣遲緩,便出現(xiàn)誤差,而且試劑長時間暴露在外,尤其室溫過高時,保存期會縮短甚至失效。


上海通蔚ELISA生物科技有限公司是一家集研發(fā)、銷售、技術(shù)服務(wù)于一體的高科技企業(yè).銷售和自產(chǎn)多種醫(yī)學(xué)科研用試劑,可為客戶訂購各大試劑公司產(chǎn)品!為方便用戶,我們還可為客戶提供實驗代測的技術(shù)服務(wù)。

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