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兔elisa試劑盒操作步驟及特點(diǎn)
更新時(shí)間:2021-08-10   點(diǎn)擊次數(shù):2060次
   兔elisa試劑盒在做試驗(yàn)前首先讓我們先來(lái)了解一下它的操作步驟,使用前,得將試劑充分混勻,然后再根據(jù)待測(cè)的樣品數(shù)量決定板條數(shù)。具體步驟跟著小編往下看吧:
  
  一、操作步驟
  1、使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
  2、根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
  3、加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。
  4、甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
  5、每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
  6、甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
  7、每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
  8、取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。
  9、在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
  
  二、兔elisa試劑盒的性能特點(diǎn):
  1、 準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0、9900。
  2、 靈敏度:zui低檢測(cè)濃度小于(參考說(shuō)明書(shū))
  3、 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
  4、 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
  5、 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
  6、 有效期:6個(gè)月。
上海通蔚生物科技有限公司

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