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ELISA試劑盒操作說明：

1、封板膜只做一次性使用。 

2、標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高時(shí)先將樣本稀釋一定倍數(shù)后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以稀釋倍數(shù)。

3、各步加樣均使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其正確性，一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)。

4、液體標(biāo)本置4℃保存應(yīng)小于1周，-20℃。

ELISA試劑盒洗板時(shí)還應(yīng)注意以下問題：

1、需每天校正注液量及殘液量，洗滌后殘液量不得大于2μl；

2、及時(shí)更換破損吸液針，避免破壞底板包被；

3、針對(duì)不同廠家酶標(biāo)板注意調(diào)整吸液頭下降高度，避免沖洗針頭卡住酶標(biāo)板；

4、注意調(diào)整洗液量，洗液量過多將溢出，過少將達(dá)不到洗滌效果；

5、關(guān)機(jī)前使用蒸餾水沖洗管道，避免洗液的結(jié)晶物堵塞管道；

6、不同種試劑盒的洗液嚴(yán)禁混合使用。

ELISA試劑盒注意事項(xiàng)：

1．邊緣效應(yīng) 使用96孔板的ELISA測(cè)定中，常發(fā)現(xiàn)有“邊緣效應(yīng)"，即外周孔顯色較中心孔深。經(jīng)研究證實(shí)在溫育中的熱力學(xué)梯度可能是根本原因之所。在實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)ELISA測(cè)定中，將板從室溫（通常在25℃左右）置于37℃溫箱，板也升溫時(shí)，在外周孔與中心孔之間可能存在一熱力學(xué)梯度。因此使用水浴或在將反應(yīng)溶液加入至板孔中時(shí)，將板和溶液均加熱至溫育溫度（如37℃），就可以很容易地排除“邊緣效應(yīng)"，并且可提高測(cè)定的重復(fù)性。

2．加樣在現(xiàn)在的ELISA商品試劑盒中，必然有使用微量加樣器加入樣本的步驟。注意的關(guān)鍵點(diǎn)是：加樣不可太快，要避免加在孔壁上部，不可濺出和產(chǎn)生氣泡。加樣太快，無法保證微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū)，易導(dǎo)致非特異吸附。濺出會(huì)對(duì)鄰近孔產(chǎn)生污染。出現(xiàn)氣泡則反應(yīng)液界面有差異。所以，有時(shí)候一份標(biāo)本用相同的試劑盒這次測(cè)定為陽(yáng)性，下次測(cè)定為陰性，往往就是上述加樣及試劑的錯(cuò)誤所致。

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